液相色譜是目前使用很廣泛的一種分析方法,儀器系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器等部分組成,結(jié)構(gòu)上和氣相色譜相似,不同之處在于,它針對流動相為液體的特點(diǎn)而做出了一些相關(guān)調(diào)整。具體來說,進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密;它的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);由于液體流動相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。
和其它分析儀器一樣,高效液相色譜保養(yǎng)維護(hù)是必不可少的,因?yàn)檫@和儀器分析的準(zhǔn)確性息息相關(guān),維護(hù)保養(yǎng)使它處于一個良好的待機(jī)狀態(tài),這樣你操作它進(jìn)行分析時就可以比較順利地獲得理想的結(jié)果。而且良好規(guī)范的操作習(xí)慣可以延長儀器使用壽命,高效液相色譜的日常操作和維護(hù)有以下三個注意事項(xiàng):
一、輸液泵的維護(hù)保養(yǎng):
1、泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相用完,否則空泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、密封環(huán)或缸體,最終產(chǎn)生漏液。
2、防止任何固體微粒進(jìn)入泵體,否則會磨損柱塞、密封環(huán)缸體和單向閥,因此應(yīng)預(yù)先對流動相進(jìn)行過濾。泵的入口都應(yīng)該連接砂濾棒(或片),輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常更換。
3、流動相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì),含有緩沖液的流動相不應(yīng)保留在泵內(nèi),尤其是停泵過夜或更長時間。分析工作結(jié)束后必須用純水充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護(hù)的溶劑(對于反相鍵合固定相,可以是甲醇或甲醇和水)
4、輸液泵的工作壓力不要超過規(guī)定的最高壓力,否則會使高壓密封環(huán)變形,產(chǎn)生漏液。
二、選擇流動相時應(yīng)注意的幾個問題:
1、盡量使用高純度試劑作流動相,防止微量雜質(zhì)長期累積損壞色譜柱和使檢測器噪聲增加。
2、避免流動相與固定相發(fā)生作用而使柱效下降或損壞柱子。
3、試樣在流動相中應(yīng)有適宜的溶解度,防止產(chǎn)生沉淀并在柱中沉積。
4、流動相同時還應(yīng)滿足檢測器的要求。當(dāng)使用紫外檢測器時,流動相不應(yīng)有較強(qiáng)的紫外吸收,一般檢測波長應(yīng)大于流動相的截止波長。
三、檢測器維護(hù)保養(yǎng):
1、流通池進(jìn)入氣泡會干擾基線,并極難排出,應(yīng)使用充分脫氣的流動相,以減少氣泡的產(chǎn)生。
2、應(yīng)定期沖洗系統(tǒng),避免流通池干涸。
3、塵埃在靜電的作用下容易覆蓋在光學(xué)元件上,使光傳播效率降低,增加了光散射,影響分析效果,因此檢測器周圍的環(huán)境應(yīng)保持清潔。
4、檢測器中氘燈(光源)隨著使用時間的增加,氘燈強(qiáng)度降低,噪音會不斷增大,故分析前柱平衡得差不多時,再打開檢測器,分析工作結(jié)束及時關(guān)閉檢測器(頻繁開關(guān)檢測器也會縮短檢測器壽命,一般開啟間隔少于4小時,不建議關(guān)閉檢測器)。
以上就是高效液相色譜使用和維護(hù)的三個注意事項(xiàng),供大家參考!